技術原理(li)
CRISPR/Cas9(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是最新出現的一種由sgRNA指(zhi)導Cas核酸(suan)酶對靶向基因(yin)進行(xing)特(te)(te)定(ding)(ding)(ding)DNA修飾的技術。在這(zhe)一系統中,sgRNA引導序列靶定(ding)(ding)(ding)位(wei)(wei)點剪切(qie)雙(shuang)鏈DNA達到對基因(yin)組DNA 進行(xing)修飾的目(mu)的。CRISPR/Cas9系統能(neng)夠(gou)對小鼠(shu)基因(yin)組特(te)(te)定(ding)(ding)(ding)基因(yin)位(wei)(wei)點進行(xing)精確編(bian)輯,目(mu)前瑞思元已(yi)經成功將此技術應用于小鼠(shu)基因(yin)敲(qiao)除/敲(qiao)入模(mo)型(xing)(xing)制備,以及(ji)條件性敲(qiao)除(Loxp系統)模(mo)型(xing)(xing)制備。
目前(qian)瑞思元采取優化過(guo)(guo)的野生型Cas9和雙(shuang)切(qie)口(kou)Cas9n(Optimized Cas9 System,OCAS and OCASn)。采用優化過(guo)(guo)的雙(shuang)切(qie)口(kou)Cas9n(OCASn)可以將脫靶效應降到最低。