技術原理
CRISPR/Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic
Repeats）是最新出(chu)現的一種(zhong)由sgRNA指導Cas核酸酶對靶(ba)向基(ji)因(yin)進(jin)行(xing)特定(ding)DNA修(xiu)飾(shi)的技術。在這一系統中，sgRNA引(yin)導序列靶(ba)定(ding)位點剪切(qie)雙鏈DNA達到對基(ji)因(yin)組DNA 進(jin)行(xing)修(xiu)飾(shi)的目的。CRISPR/Cas9系統能夠(gou)對小鼠基(ji)因(yin)組特定(ding)基(ji)因(yin)位點進(jin)行(xing)精確編輯，目前瑞思(si)元已經成功將此技術應用(yong)于小鼠基(ji)因(yin)敲除(chu)/敲入模(mo)型制(zhi)備(bei)，以及(ji)條件(jian)性(xing)敲除(chu)（Loxp系統）模(mo)型制(zhi)備(bei)。
目(mu)前(qian)瑞(rui)思元采取優(you)化(hua)過(guo)(guo)的野生型Cas9和(he)雙(shuang)切口Cas9n（Optimized Cas9 System,OCAS and OCASn）。采用優(you)化(hua)過(guo)(guo)的雙(shuang)切口Cas9n(OCASn)可以將(jiang)脫(tuo)靶效應降到最(zui)低。
條件(jian)性基(ji)因(yin)敲除小鼠
應用sgRNA-Cas9和donor的方法將loxP敲入(ru)到目的基因(yin)兩側，依(yi)賴(lai)于Cre酶進行條件敲除。
運用
研究完全性(xing)敲除后致死性(xing)目的基因(yin)的生理或(huo)病理功能；
研究(jiu)目(mu)的基因在(zai)特定(ding)組(zu)織(zhi)或細胞中(zhong)的功(gong)能(neng)；
研究目(mu)的基因在特定時(shi)期或特定階(jie)段發揮的作用(yong)；
技術優勢
研發周期(qi)短（4-6個(ge)月），同源重組效率(lv)高；
打破對小(xiao)鼠遺傳(chuan)品(pin)系(xi)的限(xian)制，可以實現不同遺傳(chuan)背景或(huo)在已有(you)基(ji)(ji)因(yin)修飾小(xiao)鼠模型(xing)基(ji)(ji)礎上進(jin)行基(ji)(ji)因(yin)編輯；
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